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簡(jiǎn)要描述：Cas9蛋白可與向?qū)NA （gRNA）形成一種非常穩(wěn)定的核糖核蛋白（RNP）復(fù)合物，作為CRISPR/Cas9系統(tǒng)的一種組分，Cas9 RNP復(fù)合物可以在進(jìn)入細(xì)胞后，通過N端核定位信號(hào) (NLS),增加入細(xì)胞核的效率。李記生物精心篩選及優(yōu)化核定位信號(hào)（NLS），并插入多個(gè)NLS, 提供的NLS-Cas9核酸酶可更高效幫助RNP入核，增加基因組DNA切割的幾率，在所有已驗(yàn)證的細(xì)胞系中（包括標(biāo)準(zhǔn)、免
產(chǎn)品型號(hào)：AM01L101廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家更新時(shí)間：2024-08-07訪 問 量：752產(chǎn)品分類
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| 品牌 | Life-iLab/李記生物 | 貨號(hào) | AM01L101 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 8nmol(130ul) | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品描述
Cas9蛋白可與向?qū)NA （gRNA）形成一種非常穩(wěn)定的核糖核蛋白（RNP）復(fù)合物，作為CRISPR/Cas9系統(tǒng)的一種組分，Cas9 RNP復(fù)合物可以在進(jìn)入細(xì)胞后，通過N端核定位信號(hào) (NLS),增加入細(xì)胞核的效率。李記生物精心篩選及優(yōu)化核定位信號(hào)（NLS），并插入多個(gè)NLS, 提供的NLS-Cas9核酸酶可更高效幫助RNP入核，增加基因組DNA切割的幾率，在所有已驗(yàn)證的細(xì)胞系中（包括標(biāo)準(zhǔn)、免疫、原代以及干細(xì)胞）具有穩(wěn)定的高編輯效率。本產(chǎn)品為工業(yè)客戶包裝。
訂購(gòu)信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
NLS-Cas9 Nuclease | AM01L101 | 8nmol (130μL) |
產(chǎn)品參數(shù)
來源 | 重組Cas9來源于大腸桿菌 |
物種 | 釀膿性鏈球菌 |
標(biāo)簽 | 無 |
分子量 | 164kDa |
反應(yīng)溫度 | 37℃ |
溶劑 | 25 mM Tris,300 mM NaCl,0.1 mM EDTA,50%甘油，pH8.0 at 25℃ |
運(yùn)輸與保存
干冰運(yùn)輸。-20℃保存，有效期12個(gè)月。
使用說明
體外切割建議方案 | 100 μL反應(yīng)電轉(zhuǎn)體系 |
Nuclease-free water | 69 μL |
10 X Cas9 Nuclease Reaction Buffer | 10μL |
300 nM sgRNA | 10μL(30 nM final) |
NLS-Cas9 Nuclease | 1-2μL(0.5-1 μM final) |
Reaction volume | 90 μL |
Pre-incubate for 10 minutes at 25℃ | |
30 nM substrate DNA | 10 μL (3 nM final) |
Total reaction volume | 100 μL |
Incubate at 37 ℃ for 1 hour and proceed with fragment analysis | |
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
2. 參考反應(yīng)體系為 100μL，可以等比例放大或縮小。
3. 實(shí)驗(yàn)操作過程佩戴口罩、使用 Nuclease-free 的耗材與試劑，避免 sgRNA 降解。
4. 為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果，請(qǐng)勿進(jìn)行凍融處理。
5. 10X Reaction Buffer 配方: 200 mM HEPES, 1M NaCl, 50mM MgCl, 1mM EDTA, pH 6.5 at 25℃。
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